Plasmide Double Nickase (h) RBM35B: sc-408008-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RBM35B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RBM35B Double Nickase (h) et le plasmide RBM35B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ESRP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RBM35B | sc-408008-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RBM35B | sc-408008-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ESRP2 (RBM35B) est une protéine épithéliale spécifique de liaison à l’ARN qui régule des programmes d’épissage alternatif des pré‑ARNm impliqués dans la polarité cellulaire, l’adhésion et la différenciation. En modulant l’inclusion d’exons au sein de réseaux liés à la transition épithélio‑mésenchymateuse (TEM/EMT), ESRP2 contribue au maintien de l’identité épithéliale et influence les sorties de signalisation de voies telles que celles des récepteurs à activité tyrosine kinase et des réponses transcriptionnelles associées au TGF‑β. Une expression dérégulée d’ESRP2 ou une activité d’épissage altérée a été associée à des changements d’utilisation d’isoformes dans des modèles de progression liés au cancer, ainsi qu’à des perturbations du développement épithélial et de la fonction de barrière. En tant que régulateur de l’épissage, ESRP2 offre un point d’entrée mécanistique pour étudier des phénotypes dépendants des isoformes, le remodelage du transcriptome et des défauts de maturation/traitement de l’ARN dans des systèmes cellulaires humains.
RBM35B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ESRP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ESRP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ESRP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ESRP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.