Plásmido Doble Nickase (h) RBM15B: sc-412040-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RBM15B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RBM15B (h) y el plásmido de doble nickasa RBM15B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RBM15B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RBM15B | sc-412040-NIC | 20 µg | $410.00 |
RBM15B (proteína 15B con motivo de unión a ARN) es una proteína nuclear de unión a ARN implicada en la regulación génica postranscripcional, incluido el control del procesamiento del pre-ARNm y la estabilidad del ARNm mediante interacciones con la maquinaria de empalme (splicing) y de vigilancia del ARN. Como miembro de la familia RBM15, se asocia con la regulación del destino de los transcritos y puede influir en redes de señalización epitranscriptómica que modulan el metabolismo del ARN. Las alteraciones en el procesamiento del ARN y la actividad desregulada de proteínas de unión a ARN son características recurrentes en el cáncer y en trastornos del neurodesarrollo y relacionados con el sistema inmunitario, lo que convierte a RBM15B en un nodo útil para desentrañar programas de expresión génica relevantes para la enfermedad. Los estudios de perturbación de RBM15B ayudan a cartografiar circuitos reguladores de ARN que afectan la proliferación celular, la diferenciación y las respuestas al estrés.
RBM15B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RBM15B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RBM15B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RBM15B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RBM15B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.