Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO RAP1 (h): sc-401709
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- RAP1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique RAP1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RAP1 Antibody (4C8/1): sc-53434
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO RAP1 (h) | sc-401709 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
TERF2IP code RAP1, un composant essentiel du complexe shelterin qui s’associe au facteur de liaison aux répétitions télomériques 2 (TRF2) afin de protéger les extrémités des chromosomes contre une activation inappropriée des signaux de dommages à l’ADN et contre les fusions bout à bout. Au-delà de la protection des extrémités télomériques, RAP1 contribue à l’homéostasie de la longueur des télomères, aux réponses au stress de réplication au niveau des télomères et, plus largement, à la stabilité du génome via la coordination des voies de réparation de l’ADN et des points de contrôle. RAP1 a également été impliquée dans la régulation transcriptionnelle sur des sites extra-télomériques, reliant la biologie des télomères à la chromatine et aux programmes d’expression génique. La dérégulation de la fonction de TERF2IP/RAP1 est pertinente pour les phénotypes de dysfonctionnement télomérique, l’instabilité génomique et les processus de transformation cellulaire étudiés dans des modèles liés au cancer et au vieillissement.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO RAP1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TERF2IP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TERF2IP, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TERF2IP à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine RAP1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TERF2IP pour l'étude de la signalisation de RAP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de TERF2IP essentiels à la fonction de RAP1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TERF2IP pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le RAP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le RAP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TERF2IP. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le RAP1 plasmide HDR (h) et le RAP1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TERF2IP pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TERF2IP définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.