Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
RAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401709
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RAP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RAP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RAP1 Anticorpo (4C8/1): sc-53434
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401709 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TERF2IP codifica a RAP1, um componente central do complexo shelterina que se associa ao fator 2 de ligação a repetições teloméricas (TRF2) para ajudar a proteger as extremidades dos cromossomos contra sinalização inadequada de dano ao DNA e fusões extremidade a extremidade. Além da proteção das extremidades teloméricas, a RAP1 contribui para a homeostase do comprimento dos telômeros, para respostas ao estresse de replicação nos telômeros e para a estabilidade genômica mais ampla por meio da coordenação de vias de reparo de DNA e de checkpoints. A RAP1 também tem sido implicada na regulação transcricional em sítios extrateloméricos, conectando a biologia dos telômeros à cromatina e a programas de expressão gênica. A desregulação da função de TERF2IP/RAP1 é relevante para fenótipos de disfunção telomérica, instabilidade genômica e processos de transformação celular estudados em modelos de câncer e de envelhecimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RAP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TERF2IP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TERF2IP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TERF2IP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RAP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TERF2IP para a investigação da sinalização de RAP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TERF2IP críticos para a função RAP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TERF2IP para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TERF2IP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RAP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RAP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TERF2IP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TERF2IP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.