PTPε Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405606
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PTPε El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PTPε, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PTPε Anticuerpo (G-2): sc-515692
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PTPε Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405606 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PTPRE codifica la fosfatasa de tirosina proteica épsilon (PTPε), una fosfatasa de tipo receptor y citosólica que modula la señalización al desfosforilar residuos de fosfotirosina en sustratos clave de quinasas. PTPε participa en el control del output de las vías MAPK y JAK/STAT y puede ajustar la señalización de receptores tirosina quinasa y de quinasas de la familia Src, influyendo en la proliferación, la adhesión y la migración celulares, así como en los umbrales de activación de células inmunitarias. Al moldear redes de señalización dependientes de la fosforilación, PTPε se estudia en contextos de desregulación de la señalización por factores de crecimiento, señalización inflamatoria y reconfiguración de vías oncogénicas. Su localización y actividad específicas por isoforma hacen de PTPRE un nodo útil para diseccionar el control compartimentalizado de las fosfatasas sobre la señalización celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PTPε (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PTPRE en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PTPRE junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PTPRE tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PTPε.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PTPRE para la investigación de la señalización de PTPε, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PTPRE críticos para la función de PTPε
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PTPRE para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PTPε CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PTPε CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PTPRE. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PTPε (h) y el plásmido HDR PTPε (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PTPRE para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PTPRE definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.