Plasmide Double Nickase (h) PT: sc-417829-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PT correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PT Double Nickase (h) et le plasmide PT Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PTMA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PT | sc-417829-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **PTMA** code la prothymosine alpha, une petite protéine nucléaire acide impliquée dans l’organisation de la chromatine, la liaison aux histones et la régulation de programmes transcriptionnels associés à la prolifération et à la survie cellulaires. PTMA participe à des processus tels que le contrôle de l’apoptose, les réponses au stress oxydatif et la progression du cycle cellulaire, et a été reliée à des voies impliquant la signalisation **NF-κB** ainsi qu’à des réseaux plus larges d’expression génique induite par le stress. Une expression dérégulée de PTMA a été rapportée dans de nombreux contextes cancéreux et immunologiques, ce qui soutient son utilisation comme nœud mécanistique dans des études portant sur la biologie tumorale, l’inflammation et la régulation du destin cellulaire. En tant que facteur principalement nucléaire, PTMA est également utilisée pour étudier comment les protéines associées à la chromatine influencent la stabilité du génome et la plasticité transcriptionnelle.
PT Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PTMA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PTMA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PTMA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PTMA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.