Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PSPH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403897
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PSPH O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PSPH, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PSPH Anticorpo (H-10): sc-271421
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PSPH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403897 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A fosfoserina fosfatase (PSPH) catalisa a etapa final da via de biossíntese da serina fosforilada, convertendo O-fosfo-L-serina em L-serina e fosfato inorgânico. Ao controlar a disponibilidade intracelular de serina, a PSPH sustenta o metabolismo de um carbono e a síntese de nucleotídeos, o equilíbrio redox por meio da produção de glutationa e a síntese de lipídios, conectando o metabolismo de aminoácidos a programas de proliferação e de resposta ao estresse. A atividade da PSPH se integra ao reprogramação metabólica observada em células de divisão rápida e é frequentemente estudada em conjunto com PHGDH e PSAT1 no eixo serina–glicina. A expressão desregulada de PSPH tem sido associada a fenótipos metabólicos alterados no câncer e em outros distúrbios caracterizados por perturbações no metabolismo de aminoácidos e de um carbono, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de vulnerabilidades metabólicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PSPH (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PSPH em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PSPH, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PSPH na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PSPH.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PSPH para a investigação da sinalização de PSPH, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PSPH críticos para a função PSPH
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PSPH para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PSPH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PSPH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PSPH. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PSPH Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PSPH (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PSPH para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PSPH definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.