Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
PRX III Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401730
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PRX III El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PRX III, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PRX III Anticuerpo (1): sc-130336
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PRX III Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401730 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PRDX3 codifica la peroxirredoxina III (PRX III), una peroxidasa mitocondrial dependiente de tioredoxina que detoxifica el peróxido de hidrógeno y los hidroperóxidos lipídicos para preservar el equilibrio redox. Al amortiguar las especies reactivas de oxígeno mitocondriales, PRX III favorece la fosforilación oxidativa, limita el daño oxidativo al ADN mitocondrial y a las proteínas, e influye en la señalización sensible al estado redox y en la apoptosis. La actividad de PRDX3 se integra con sistemas antioxidantes mitocondriales como tioredoxina 2/tioredoxina reductasa y contribuye al mantenimiento de la integridad mitocondrial bajo estrés metabólico e inflamatorio. Las alteraciones en la expresión o la función de PRDX3 se han asociado con fenotipos de estrés oxidativo y se estudian en el contexto de trastornos en los que están implicados la desregulación redox mitocondrial, la señalización de supervivencia celular y la reprogramación metabólica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRX III (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PRDX3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PRDX3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PRDX3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRX III.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PRDX3 para la investigación de la señalización de PRX III, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PRDX3 críticos para la función de PRX III
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PRDX3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PRX III CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PRX III CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PRDX3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRX III (h) y el plásmido HDR PRX III (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PRDX3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PRDX3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.