Plasmide Double Nickase (h) PRX II: sc-401330-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PRX II correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PRX II Double Nickase (h) et le plasmide PRX II Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PRDX2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PRX II Antibody (A-2): sc-515428
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PRX II | sc-401330-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PRX II | sc-401330-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDX2 code la peroxyrédoxine‑2 (PRX II), une peroxydase dépendante des thiols qui réduit le peroxyde d’hydrogène et les hydroperoxydes organiques en s’appuyant sur le système thioredoxine afin de maintenir l’homéostasie rédox. En façonnant des gradients locaux de H2O2, PRX II module une signalisation sensible à l’état rédox, influençant la dynamique des voies MAPK et NF‑κB, la S‑glutathionylation des protéines et les réponses au stress oxydant. Dans les cellules humaines, PRX II contribue à l’intégrité des érythrocytes et, plus largement, à des programmes cytoprotecteurs en limitant les dommages macromoléculaires induits par les ROS et en régulant l’apoptose ainsi que la signalisation inflammatoire. Des altérations de l’expression ou de l’activité de PRDX2 ont été associées à des contextes de stress oxydant et de dérégulation de la signalisation rédox observés en biologie des cancers, dans la neuroinflammation et dans des modèles de maladies cardiométaboliques, ce qui en fait un nœud mécanistique pertinent pour la recherche sur les voies rédox.
PRX II Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PRDX2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PRDX2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PRDX2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PRDX2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.