PRX II Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401330-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRX IIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PRX II (h) e o Plasmídeo Double Nickase PRX II (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRDX2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PRX II Anticorpo (A-2): sc-515428
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRX II Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401330-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRX II Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401330-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDX2 codifica a peroxirredoxina-2 (PRX II), uma peroxidase dependente de tióis que reduz o peróxido de hidrogénio e hidroperóxidos orgânicos usando o sistema da tiorredoxina para manter a homeostase redox. Ao moldar gradientes locais de H2O2, a PRX II modula a sinalização sensível ao estado redox, influenciando a dinâmica das vias MAPK e NF-κB, a S-glutationilação de proteínas e as respostas ao stress oxidativo. Em células humanas, a PRX II sustenta a integridade dos eritrócitos e programas citoprotetores mais amplos ao limitar danos macromoleculares induzidos por ROS e ao regular a apoptose e a sinalização inflamatória. Alterações na expressão ou atividade de PRDX2 têm sido associadas a contextos de stress oxidativo e de sinalização redox desregulada observados na biologia do cancro, na neuroinflamação e em modelos de doenças cardiometabólicas, apoiando a sua utilização como um nó mecanístico na investigação de vias redox.
PRX II O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRDX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRDX2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRDX2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRDX2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.