Plasmide Double Nickase (h) Progesterone Receptor: sc-400198-NIC

PGR code le récepteur humain de la progestérone, un facteur de transcription nucléaire activé par un ligand, qui régule des programmes géniques contrôlant le développement des tissus reproducteurs, la décidualisation, ainsi que la prolifération et la différenciation des cellules sensibles aux signaux endocriniens. Après la liaison de la progestérone, PGR se fixe à des éléments de réponse hormonale et recrute des corégulateurs afin de moduler la chromatine et la transcription, tout en s’articulant avec les voies MAPK/ERK et PI3K/AKT, et via un dialogue avec la signalisation du récepteur des œstrogènes, pour façonner les réponses du cycle cellulaire et de l’inflammation. Une expression altérée de PGR, un déséquilibre des isoformes ou une modification du signal émis sont impliqués dans la biologie hormonodépendante et font l’objet de nombreuses études dans des contextes tels que les cancers du sein et de l’endomètre, l’endométriose, les fibromes utérins et l’infertilité. Ces caractéristiques font de PGR un nœud central pour étudier les réseaux transcriptionnels des récepteurs aux stéroïdes et la régulation endocrinienne dans des modèles cellulaires humains.

Progesterone Receptor Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PGR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PGR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PGR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PGR.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.