Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Progesterone Receptor (m): sc-422214
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Progesterone Receptor Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Progesterone Receptor, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Progesterone Receptor Antibody (A-2): sc-398898
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Progesterone Receptor (m) | sc-422214 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Pgr code le récepteur de la progestérone chez la souris, un récepteur nucléaire des hormones stéroïdiennes activé par un ligand, qui agit comme facteur de transcription contrôlant les programmes géniques en aval de la progestérone. Après liaison de l’hormone, PGR forme des dimères, se transloque dans le noyau et régule l’accessibilité de la chromatine ainsi que le recrutement de l’ARN polymérase II, afin de coordonner la différenciation épithéliale, la déciduation, l’implantation et le développement de la glande mammaire. La signalisation de PGR s’interface avec les voies du récepteur des œstrogènes, les cascades MAPK/PI3K et des complexes de corégulateurs pour ajuster finement la progression du cycle cellulaire, la modulation immunitaire et le remodelage tissulaire. Une activité de Pgr dérégulée ou une modification de l’équilibre des isoformes du récepteur est largement utilisée pour modéliser des phénotypes endocriniens de la reproduction et des changements hormonodépendants pertinents pour la biologie utérine et la physiologie mammaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Progesterone Receptor (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Pgr dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Pgr, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Pgr à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Progesterone Receptor.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Pgr pour l'étude de la signalisation de Progesterone Receptor, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Pgr essentiels à la fonction de Progesterone Receptor
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Pgr pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Progesterone Receptor plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Progesterone Receptor plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Pgr. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Progesterone Receptor plasmide HDR (m) et le Progesterone Receptor (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Pgr pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Pgr définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.