PRMT8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404371

Descripción general

PRMT8 (metiltransferasa de arginina de proteínas 8) es una PRMT de tipo I asociada a la membrana que cataliza la dimetilación asimétrica de residuos de arginina en sustratos proteicos, modulando las interacciones proteína–proteína, la localización subcelular y la salida de señalización. Contribuye a la regulación de redes de modificaciones postraduccionales que se interconectan con la dinámica del citoesqueleto, el tráfico vesicular y las vías de transducción de señales moduladas por la metilación de arginina. La actividad de PRMT8 se vincula al control de procesos neuronales y sinápticos, y los programas de metilación de la familia PRMT alterados se estudian con frecuencia en contextos de neurobiología, diferenciación celular y señalización oncogénica. La metilación de arginina desregulada y la remodelación de sustratos asociada a PRMT también se investigan por su papel en respuestas al estrés y cambios en la proteostasis observados en múltiples modelos relevantes para enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRMT8 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PRMT8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PRMT8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PRMT8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRMT8.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PRMT8 para la investigación de la señalización de PRMT8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PRMT8 críticos para la función de PRMT8
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PRMT8 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PRMT8 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PRMT8 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PRMT8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRMT8 (h) y el plásmido HDR PRMT8 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PRMT8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PRMT8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.