Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PRMT2 Double Nickase Plasmid (h): sc-405107-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das PRMT2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- PRMT2 Double-Nickase-Plasmid (h) und PRMT2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf PRMT2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: PRMT2: sc-393254
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PRMT2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-405107-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRMT2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRMT2 kodiert eine Protein-Arginin-Methyltransferase vom Typ I, die die asymmetrische Dimethylierung von Argininresten an Histonen und anderen nukleären Proteinen katalysiert und dadurch Chromatinstruktur und transkriptionellen Output mitprägt. Durch die Modulation RNA-Polymerase-II-gekoppelter regulatorischer Programme sowie methylierungsabhängiger Protein-Protein-Interaktionen trägt PRMT2 zur Kontrolle der Zellzyklusprogression, der Differenzierung und zellulärer Stressantworten bei. PRMT2 wurde mit Crosstalk zu Hormonrezeptor-Signalwegen und NF-κB-assoziierten Transkriptionsnetzwerken in Verbindung gebracht, wodurch seine Aktivität an kontextabhängige Entzündungs- und Stoffwechselregulation gekoppelt ist. Eine dysregulierte PRMT2-Expression oder -Aktivität wurde mit onkogenen Transkriptionszuständen und weiteren komplexen Krankheitsphänotypen assoziiert und macht PRMT2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische Studien der epigenetischen Regulation.
PRMT2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des PRMT2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von PRMT2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die PRMT2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit PRMT2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.