Plasmide Double Nickase (m) PRL-2: sc-422500-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) PRL-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PRL-2 Double Nickase (m) et le plasmide PRL-2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ptp4a2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) PRL-2 | sc-422500-NIC | 20 µg | $410.00 |
La souris *Ptp4a2* code PRL-2, une phosphatase prénylée à tyrosine impliquée dans l’ajustement de la signalisation dépendante de la phosphorylation au niveau de la membrane plasmique et des endomembranes. L’activité de PRL-2 a été associée à la régulation de la progression du cycle cellulaire, au remodelage du cytosquelette et au comportement migratoire, via des voies qui recoupent les cascades MAPK/ERK et PI3K–AKT ainsi que le contrôle en aval de la dynamique des adhésions focales. Une expression altérée des phosphatases de la famille PRL est fréquemment liée à des phénotypes oncogéniques, notamment une prolifération et une invasion accrues, ce qui fait de *Ptp4a2* un nœud pertinent pour des études mécanistiques de la biologie tumorale et des programmes associés aux métastases. Dans des contextes immunitaires et du développement, PRL-2 est également étudiée pour ses rôles dans l’intégration des signaux et l’homéostasie tissulaire, ce qui soutient son utilisation pour la cartographie des voies et la génomique fonctionnelle.
PRL-2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ptp4a2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ptp4a2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ptp4a2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ptp4a2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.