PRH1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422429

Descripción general

Prh1 codifica PRH1, una proteína secretada rica en prolina asociada principalmente con las glándulas salivales y los tejidos de la mucosa oral en el ratón. Se cree que PRH1 contribuye a la composición de la saliva y a funciones locales de barrera al participar en redes de proteínas extracelulares que influyen en la lubricación y la protección de la mucosa. Como factor secretado con expresión restringida a ciertos tejidos, Prh1 es útil para estudiar programas de diferenciación epitelial y la regulación génica en glándulas exocrinas. La expresión alterada de proteínas salivales puede ser informativa en modelos de inflamación oral, disfunción de glándulas salivales y cambios inducidos por el ambiente en la homeostasis de la mucosa.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRH1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Prh1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Prh1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Prh1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRH1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Prh1 para la investigación de la señalización de PRH1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Prh1 críticos para la función de PRH1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Prh1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PRH1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PRH1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Prh1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRH1 (m) y el plásmido HDR PRH1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Prh1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Prh1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.