Plásmido Doble Nickase (h) PPPDE1: sc-412095-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PPPDE1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PPPDE1 (h) y el plásmido de doble nickasa PPPDE1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DESI2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PPPDE1 | sc-412095-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PPPDE1 | sc-412095-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPPDE1 (también conocido como DESI2) codifica una proteína que contiene un dominio PPPDE e implicada en la biología de los modificadores tipo ubiquitina, con actividades descritas similares a las de una deSUMOilasa/deubiquitinasa que pueden influir en la estabilidad proteica y en la salida de las vías de señalización. Al modular los estados de modificación postraduccional, PPPDE1 puede afectar procesos como la proteostasis, las respuestas al estrés celular y el recambio proteico regulado. Las alteraciones en la dinámica de las vías de SUMO/ubiquitina se asocian con frecuencia con un control del crecimiento y un mantenimiento del genoma desregulados, lo que convierte a PPPDE1 en una diana útil para estudios mecanísticos en modelos celulares relevantes para enfermedades. Investigar la función de PPPDE1 puede ayudar a aclarar cómo el procesamiento de modificadores se integra con la regulación transcripcional y otras redes de señalización.
PPPDE1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DESI2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DESI2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DESI2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DESI2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.