Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PMM2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406428
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PMM2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PMM2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PMM2 Anticorpo (2A5): sc-517179
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PMM2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406428 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O PMM2 codifica a fosfomanomutase 2, uma enzima citosólica que interconverte manose-6-fosfato e manose-1-fosfato para sustentar a produção de GDP-manose e a glicosilação N-ligada. Por meio do seu papel na biossíntese de precursores de glicanos, o PMM2 influencia a dobra (folding) de proteínas, o controlo de qualidade, a secreção e as interações com a matriz extracelular em múltiplos tipos celulares. A redução da atividade de PMM2 está associada a distúrbios congénitos da glicosilação, nos quais a maturação deficiente de glicoproteínas perturba a sinalização, o tráfego intracelular e o desenvolvimento de órgãos. Em modelos baseados em células, a função de PMM2 é frequentemente investigada para dissecar vias de proteostase e de resposta ao stress dependentes de glicosilação, incluindo a homeostase do retículo endoplasmático (RE).
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PMM2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PMM2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PMM2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PMM2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PMM2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PMM2 para a investigação da sinalização de PMM2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PMM2 críticos para a função PMM2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PMM2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PMM2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PMM2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PMM2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PMM2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PMM2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PMM2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PMM2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.