Plásmido Doble Nickase (h) PLRP2: sc-409664-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PLRP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PLRP2 (h) y el plásmido de doble nickasa PLRP2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PNLIPRP2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PLRP2 Anticuerpo (D-1): sc-376236
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PLRP2 | sc-409664-NIC | 20 µg | $410.00 |
PNLIPRP2 codifica la proteína 2 relacionada con la lipasa pancreática (PLRP2), una lipasa secretada que contribuye a la hidrólisis de los triacilglicéridos de la dieta y otros lípidos relacionados en la luz intestinal. PLRP2 participa en procesos digestivos y metabólicos que influyen en la absorción intestinal de lípidos, la producción posterior de quilomicrones y la homeostasis energética sistémica. La variación en la actividad de las lipasas digestivas es relevante para estudios de fenotipos de malabsorción y desregulación metabólica, y PLRP2 suele evaluarse junto con otras enzimas pancreáticas para comprender la función coordinada del páncreas exocrino. En investigación biomédica, PNLIPRP2 constituye un punto de estudio manejable para investigar el manejo de lípidos en la interfaz intestino–páncreas y las consecuencias de una lipólisis luminal alterada sobre vías inflamatorias y metabólicas.
PLRP2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PNLIPRP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PNLIPRP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PNLIPRP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PNLIPRP2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.