Partículas Lentivirales de Activación (h) PLAC8: sc-405093-LAC

PLAC8 (placenta-associated 8), también conocido como Onzin, codifica una pequeña proteína rica en cisteína implicada en la regulación de la diferenciación celular, la homeostasis epitelial y la señalización de respuesta al estrés. En células humanas, PLAC8 se ha vinculado a la modulación de programas de proliferación y supervivencia, incluidas vías asociadas a las salidas de señalización de MAPK y PI3K/AKT, así como a procesos relacionados con la organización del citoesqueleto y la dinámica de membranas. Se ha descrito una expresión alterada de PLAC8 en múltiples contextos tumorales y estados inflamatorios, donde se correlaciona con cambios en la invasión, la adaptación metabólica y fenotipos asociados al sistema inmunitario. Estas características hacen de PLAC8 un objetivo útil para desentrañar redes transcripcionales que controlan las decisiones de linaje y los comportamientos celulares sensibles al microambiente.

Las partículas de activación lentiviral PLAC8 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de PLAC8 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral PLAC8 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción PLAC8, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de PLAC8. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo PLAC8 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.