PLAC1 Plasmide Double Nickase (m): sc-425008-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PLAC1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PLAC1 Double Nickase Plasmid (m) e il PLAC1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Plac1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PLAC1 Antibody (G-1): sc-365919
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PLAC1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-425008-NIC | 20 µg | $410.00 |
Plac1 codifica PLAC1, una proteina di membrana associata alla placenta e particolarmente arricchita in questo tessuto, implicata nella differenziazione dei trofoblasti, nella morfogenesi placentare e nella regolazione della biologia dell’interfaccia feto-materna nel topo. L’espressione di PLAC1 è collegata a processi come l’adesione cellulare, la migrazione e la formazione di una barriera di tipo epiteliale che sostengono il normale sviluppo della placenta e lo scambio di nutrienti. Una disregolazione di PLAC1 è stata associata a una crescita placentare aberrante e a fenotipi riproduttivi, rendendo Plac1 un locus utile per analizzare le reti geniche che governano lo sviluppo extraembrionale e la segnalazione endocrina. Inoltre, PLAC1 è spesso studiata come antigene oncofetale in biologia dei tumori, a supporto di ricerche meccanicistiche sulla riprogrammazione dello sviluppo e sui programmi di espressione genica associati ai tumori, senza implicare un’utilità clinica.
PLAC1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Plac1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Plac1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Plac1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Plac1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.