PKC beta Lentiviral Activation Particles (h): sc-400263-LAC

PRKCB kodiert die Proteinkinase C beta (PKCβ), eine diacylglycerol- und Ca²⁺-responsive Serin/Threonin-Kinase, die rezeptorvermittelte Phospholipase‑C‑Signalgebung mit Phosphorylierungsprogrammen verknüpft, welche Proliferation, Differenzierung, Migration und Überleben steuern. PKCβ wirkt nachgeschaltet von Antigenrezeptoren und Fc‑Rezeptoren und prägt dadurch die B‑Zell‑Aktivierung sowie die angeborene Immun-Signalgebung; zudem moduliert sie Endothel- und Thrombozytenantworten durch die Regulation der Zytoskelettdynamik und der Sekretion. In der Krebsbiologie überschneidet sich PRKCB‑abhängige Signalgebung mit den Outputs der MAPK/ERK‑, NF‑κB‑ und PI3K‑Signalwege, die Zellzustandsübergänge und Stressantworten beeinflussen; eine Fehlregulation wurde außerdem mit inflammatorischer und vaskulärer Pathophysiologie in Verbindung gebracht. Diese Eigenschaften machen PRKCB zu einem nützlichen Knotenpunkt, um Mechanismen der Signaltransduktion, phosphorylierungsabhängiges Crosstalk zwischen Signalwegen und kontextspezifische Transkriptionsprogramme in humanen Zellmodellen zu untersuchen.

PKC beta Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PRKCB-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PKC beta Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PRKCB-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PKC beta-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PRKCB-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.