Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) PI 3-kinase p110β: sc-428980-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)PI 3-kinase p110β consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PI 3-kinase p110β (m) y el plásmido de doble nickasa PI 3-kinase p110β (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Pik3cb. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PI 3-kinase p110β Anticuerpo (C-8): sc-376641
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) PI 3-kinase p110β | sc-428980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) PI 3-kinase p110β | sc-428980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Pik3cb codifica la subunidad catalítica p110β de la fosfoinosítido 3‑quinasa de clase IA, una quinasa lipídica que fosforila PIP2 para generar PIP3 y propagar la señalización PI3K–AKT. En células de ratón, p110β contribuye a la señalización vinculada a receptores de factores de crecimiento y a GPCR, coordinando procesos posteriores como la supervivencia celular, la proliferación, el metabolismo, el tráfico vesicular y la dinámica del citoesqueleto. Funciona en conjunto con subunidades reguladoras p85 para controlar la amplitud de la vía y la señalización espacial. La desregulación de componentes de la vía PI3K, incluida la alteración de la actividad de p110β, se estudia ampliamente en contextos de crecimiento celular aberrante, fenotipos metabólicos y defectos de señalización relacionados con el sistema inmunitario.
PI 3-kinase p110β El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Pik3cb en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Pik3cb. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Pik3cb. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Pik3cb alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.