Plásmido Doble Nickase (h) Peroxin 26: sc-408486-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Peroxin 26 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Peroxin 26 (h) y el plásmido de doble nickasa Peroxin 26 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PEX26. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Peroxin 26 Anticuerpo (A-9): sc-376817
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Peroxin 26 | sc-408486-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **PEX26** codifica la peroxina 26, una proteína de membrana peroxisomal necesaria para la biogénesis de peroxisomas y el mantenimiento de la importación de proteínas de la matriz. PEX26 actúa en la maquinaria de importación de proteínas peroxisomales anclando en la membrana el complejo de reciclaje de la AAA ATPasa (PEX1–PEX6), lo que permite el recambio del receptor PEX5 y sostiene la importación de cargas PTS1/PTS2. A través de esta función, PEX26 respalda vías metabólicas lipídicas centradas en los peroxisomas, entre ellas la β-oxidación de ácidos grasos de cadena muy larga, la biosíntesis de fosfolípidos éter (plasmalógenos) y la homeostasis de especies reactivas de oxígeno. Las variantes patogénicas de PEX26 se asocian con trastornos de biogénesis peroxisomal dentro del espectro de Zellweger, lo que convierte a PEX26 en un objetivo clave para estudios mecanísticos de disfunción de orgánulos y de fenotipos de enfermedad metabólica.
Peroxin 26 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PEX26 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PEX26. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PEX26. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PEX26 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.