Plásmido Doble Nickase (m) Pax-9: sc-422122-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Pax-9 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Pax-9 (m) y el plásmido de doble nickasa Pax-9 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Pax9. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Pax-9 Anticuerpo (7C2): sc-56823
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Pax-9 | sc-422122-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Pax-9 | sc-422122-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Pax9 codifica Pax-9, un factor de transcripción con homeodominio tipo paired box que regula programas de expresión génica que controlan el patrón craneofacial, la odontogénesis y el desarrollo de órganos derivados de las bolsas faríngeas en el ratón. Pax-9 coordina la señalización epitelio-mesénquima y la especificación de linajes durante la embriogénesis, influyendo en vías de morfógenos como WNT, BMP, FGF y SHH que dan forma a los tejidos en desarrollo. La alteración o desregulación de Pax9 se asocia con defectos del desarrollo, incluida la agenesia dental y malformaciones craneofaciales, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar el control transcripcional de la organogénesis. En contextos adultos y de células madre/progenitoras, Pax-9 actúa como marcador y regulador de estados de diferenciación relevantes para la biología del desarrollo y el mapeo genotipo–fenotipo.
Pax-9 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Pax9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Pax9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Pax9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Pax9 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.