PARP-10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-437160

Übersicht

Parp10 kodiert PARP-10, eine Mono-ADP-Ribosyltransferase, die die Proteinfunktion durch ADP-Ribosylierung reguliert und damit die Proteinstabilität, die subzelluläre Lokalisation und Signalantworten beeinflusst. PARP-10 wird mit der Kontrolle von DNA-Schadensantworten, der Toleranz gegenüber Replikationsstress sowie chromatinassoziierten Prozessen in Verbindung gebracht und ist dabei in ubiquitinabhängige Proteinregulation und andere Netzwerke posttranslationaler Modifikationen eingebunden. In Mausmodellen wird die PARP-10-Aktivität häufig im Kontext der Genomstabilität, der Zellzyklusprogression und stressadaptiver Signalwege untersucht, die die zelluläre Homöostase prägen. Eine Fehlregulation von ADP-Ribosylierungswegen ist allgemein mit abweichender Proliferation und entzündlicher Signalgebung assoziiert, wodurch Parp10 einen nützlichen Ansatzpunkt für mechanistische Studien zur Signalweg-Kreuzregulation in krankheitsrelevanten Modellen darstellt.

Das PARP-10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Parp10-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Parp10-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Parp10 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PARP-10-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Parp10-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PARP-10-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Parp10-Exone abzielen, die für die PARP-10-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Parp10-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PARP-10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom PARP-10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Parp10-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PARP-10 HDR-Plasmid (m) und PARP-10 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Parp10-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Parp10-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.