Plásmido Doble Nickase (h) p8: sc-402153-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)p8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa p8 (h) y el plásmido de doble nickasa p8 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NUPR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) p8 | sc-402153-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) p8 | sc-402153-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NUPR1 (p8) es una pequeña proteína nuclear inducible por estrés que actúa como regulador transcripcional, coordinando la adaptación celular al daño y al estrés metabólico. Modula programas de expresión génica asociados a la cromatina implicados en la autofagia, el control del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la señalización inflamatoria, y se ha descrito interacción funcional (crosstalk) con vías como p53, NF-κB y TGF-β. La actividad alterada de NUPR1 se ha asociado con cambios en la proliferación, la susceptibilidad a la apoptosis, la plasticidad epitelio-mesenquimal y la homeostasis redox en múltiples contextos relevantes para la enfermedad, incluida la biología del cáncer y modelos de lesión tisular. Estas propiedades convierten a NUPR1 en una diana útil para desentrañar los circuitos de respuesta al estrés y los mecanismos de reprogramación transcripcional en células humanas.
p8 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NUPR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NUPR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NUPR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NUPR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.