Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Ox40 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401326
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Ox40 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Ox40, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Ox40 Anticuerpo (H-10): sc-376014
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Ox40 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401326 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TNFRSF4 codifica OX40 (CD134), un receptor coestimulador inducible de la superfamilia de receptores del TNF, expresado principalmente en linfocitos T CD4+ y CD8+ activados y en subpoblaciones de linfocitos T reguladores. Tras su unión a OX40L (TNFSF4), OX40 promueve la expansión, supervivencia y formación de memoria de los linfocitos T mediante el reclutamiento de adaptadores TRAF y la activación downstream de las vías de señalización NF-κB, MAPK y PI3K/AKT. Este eje modula la producción de citocinas, el soporte de los centros germinales y el equilibrio entre respuestas efectoras y reguladoras. La señalización desregulada de OX40 se ha implicado en la inflamación crónica y en mecanismos de enfermedades autoinmunes, y también es relevante para la evasión inmunitaria y la disfunción de linfocitos T asociada a tumores en biología del cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ox40 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TNFRSF4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TNFRSF4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TNFRSF4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ox40.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TNFRSF4 para la investigación de la señalización de Ox40, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TNFRSF4 críticos para la función de Ox40
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TNFRSF4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Ox40 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Ox40 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TNFRSF4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ox40 (h) y el plásmido HDR Ox40 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TNFRSF4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TNFRSF4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.