Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Orexin R-2: sc-402343-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Orexin R-2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Orexin R-2 (h) y el plásmido de doble nickasa Orexin R-2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HCRTR2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Orexin R-2 | sc-402343-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Orexin R-2 | sc-402343-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HCRTR2 codifica el receptor de orexina 2 (Orexin R-2), un receptor acoplado a proteína G para los neuropéptidos orexina A y orexina B que coordina el estado de alerta, la estabilidad sueño–vigilia, el apetito y la salida autonómica. Tras la unión del ligando, Orexin R-2 activa señalización Gq/Gi para modular la dinámica intracelular de Ca²⁺, la actividad de PLC/PKC y las vías MAPK/ERK aguas abajo, integrando la excitabilidad neuronal con una regulación neuroendocrina más amplia. La actividad del receptor influye en la transmisión sináptica y en circuitos vinculados al ritmo circadiano en redes hipotalámicas y del tronco encefálico. Alteraciones genéticas y funcionales de HCRTR2 se han asociado con fenotipos de sueño y vigilancia y se estudian en el contexto de mecanismos relacionados con la narcolepsia, la homeostasis metabólica y la biología de rasgos neuropsiquiátricos.
Orexin R-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HCRTR2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HCRTR2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HCRTR2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HCRTR2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.