Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
OMG Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406746
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- OMG El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico OMG, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: OMG Anticuerpo (E-8): sc-271704
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
OMG Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406746 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
OMG (osteoglicina) codifica un pequeño proteoglicano secretado rico en leucina que participa en la organización de la matriz extracelular y en la fibrilogénesis del colágeno, influyendo en la biomecánica tisular y en la señalización célula–matriz. Al modular la arquitectura de la matriz, OMG puede afectar vías vinculadas a integrinas y la disponibilidad de factores de crecimiento que moldean programas de adhesión, migración y diferenciación celular. La remodelación alterada de la matriz extracelular en la que participa OMG se ha investigado en contextos como la fibrosis, la remodelación cardiovascular y la biología del microambiente tumoral, donde la composición estromal puede afectar fenotipos asociados a la enfermedad. Estas características hacen de OMG un objetivo útil para estudiar cómo los componentes de la matriz regulan el comportamiento celular y la comunicación intercelular en sistemas humanos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO OMG (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen OMG en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del OMG junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de OMG tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína OMG.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en OMG para la investigación de la señalización de OMG, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de OMG críticos para la función de OMG
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de OMG para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido OMG CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido OMG CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus OMG. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR OMG (h) y el plásmido HDR OMG (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología OMG para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana OMG definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.