Plasmide CRISPR/Cas9 KO OLIG2 (h2): sc-400670-KO-2

Présentation

OLIG2 code un facteur de transcription de type hélice-boucle-hélice basique (bHLH) qui orchestre le développement neural en régulant la spécification de lignée et la différenciation des progéniteurs d’oligodendrocytes et des précurseurs de neurones moteurs. En concertation avec des signaux développementaux tels que Sonic hedgehog et Notch, OLIG2 contrôle des programmes d’expression génique qui influencent la progression du cycle cellulaire, l’état de la chromatine et l’engagement du destin glial dans le système nerveux central. Une expression dérégulée d’OLIG2 et des réseaux transcriptionnels en aval altérés sont impliqués dans la biologie des gliomes malins, notamment via des transitions vers des états de type progéniteur et des programmes cellulaires associés à la résistance. Ces caractéristiques font d’OLIG2 une cible utile pour étudier les circuits transcriptionnels du neurodéveloppement et la plasticité de lignée associée aux tumeurs.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO OLIG2 (h2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène OLIG2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du OLIG2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert OLIG2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine OLIG2.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en OLIG2 pour l'étude de la signalisation de OLIG2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de OLIG2 essentiels à la fonction de OLIG2
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de OLIG2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le OLIG2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le OLIG2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus OLIG2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le OLIG2 plasmide HDR (h) et le OLIG2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie OLIG2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles OLIG2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.