Plasmide CRISPR/Cas9 KO Oasl1 (m): sc-433090

Présentation

Oasl1 (2′-5′-oligoadénylate synthétase-like 1) est un gène murin induit par les interférons, impliqué dans la régulation de l’immunité innée lors des réponses antivirales. Contrairement aux membres catalytiquement actifs de la famille OAS, Oasl1 agit principalement via des interactions protéine–protéine et des interactions associées à l’ARN, qui modulent la signalisation des interférons de type I et les programmes transcriptionnels en aval. Il est associé au contrôle des voies des facteurs régulateurs de l’interféron et de circuits inflammatoires plus larges qui façonnent l’activation des cellules immunitaires et la production de cytokines. Une activité d’Oasl1 dérégulée est donc pertinente pour l’étude des mécanismes de réponses aberrantes aux interférons et des pathologies immunomédiées dans des modèles d’infection et de maladies inflammatoires.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Oasl1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Oasl1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Oasl1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Oasl1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Oasl1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Oasl1 pour l'étude de la signalisation de Oasl1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Oasl1 essentiels à la fonction de Oasl1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Oasl1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Oasl1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Oasl1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Oasl1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Oasl1 plasmide HDR (m) et le Oasl1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Oasl1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Oasl1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.