Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) OAS3: sc-434225-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)OAS3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa OAS3 (m) y el plásmido de doble nickasa OAS3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Oas3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: OAS3 Anticuerpo (D-7): sc-398225
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) OAS3 | sc-434225-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Oas3 de ratón codifica la 2′-5′-oligoadenilato sintetasa 3 (OAS3), un sensor citosólico inducible por interferón del ARN viral de doble cadena que cataliza la producción de 2-5A para activar la RNasa L y promover la degradación del ARN viral y celular. Este eje OAS3–RNasa L se integra con la señalización del interferón de tipo I, la restricción inmunitaria innata y el control de la traducción asociado al estrés, modulando las respuestas antivirales y las salidas inflamatorias. La regulación alterada de la actividad de la familia OAS se ha vinculado a programas de interferón desregulados y a patología mediada por el sistema inmunitario, lo que convierte a OAS3 en un punto de entrada útil para diseccionar las interacciones hospedador–patógeno y la dinámica de la señalización inmunitaria innata en modelos murinos.
OAS3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Oas3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Oas3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Oas3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Oas3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.