Plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup37 (h): sc-409458

Présentation

NUP37 code pour Nup37, un composant essentiel du sous-complexe Nup107–160 du complexe du pore nucléaire, qui contribue à l’intégrité de l’enveloppe nucléaire et au transport nucléocytoplasmique sélectif. En participant à l’assemblage du pore nucléaire et à sa fonction de « gating » (contrôle de passage), Nup37 influence l’export des ARN, l’import des protéines et la régulation spatiale des programmes transcriptionnels qui dépendent d’un trafic nucléaire correct. Une altération de la composition des pores nucléaires peut perturber la stabilité du génome et la progression mitotique, des processus fréquemment modifiés dans des contextes de maladies prolifératives. Ainsi, NUP37 est couramment étudié dans des voies reliant le transport nucléaire, le contrôle du cycle cellulaire et la signalisation en réponse au stress.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup37 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène NUP37 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du NUP37, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert NUP37 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Nup37.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en NUP37 pour l'étude de la signalisation de Nup37, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de NUP37 essentiels à la fonction de Nup37
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de NUP37 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Nup37 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Nup37 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus NUP37. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Nup37 plasmide HDR (h) et le Nup37 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie NUP37 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles NUP37 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.