Plasmide Double Nickase (m) NRK: sc-424201-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NRK correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NRK Double Nickase (m) et le plasmide NRK Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nrk. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NRK | sc-424201-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) NRK | sc-424201-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Nrk** code la **Nik-related kinase (NRK)**, une protéine kinase sérine/thréonine impliquée dans des réseaux de signalisation qui coordonnent la prolifération cellulaire, les réponses au stress et le développement des tissus. NRK a été associée à la régulation de cascades de kinases, notamment de processus liés aux MAPK, et contribue au contrôle des programmes de croissance et de différenciation cellulaires. Chez la souris, la fonction de **Nrk** est particulièrement pertinente pour le développement placentaire et la biologie des trophoblastes, ce qui en fait un modèle utile pour étudier la régulation du développement et la signalisation à l’interface materno-fœtale. Une signalisation kinase dérégulée impliquant NRK a été étudiée dans des contextes de croissance anormale et de voies associées au cancer, ce qui étaye sa pertinence pour la modélisation mécanistique des maladies en recherche biomédicale.
NRK Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nrk dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nrk. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nrk. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nrk.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.