Plasmide Double Nickase (m) Nox4: sc-424443-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Nox4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nox4 Double Nickase (m) et le plasmide Nox4 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nox4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Nox4 | sc-424443-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Nox4 | sc-424443-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nox4 (NADPH oxydase 4) est une enzyme catalytique productrice d’ERO (espèces réactives de l’oxygène) dans les cellules de souris, qui produit de façon constitutive du peroxyde d’hydrogène afin de façonner la signalisation rédox. Les oxydants dérivés de Nox4 modulent des voies telles que TGF-β/SMAD, MAPK, PI3K–AKT et NF-κB, influençant des programmes transcriptionnels qui régissent la différenciation, le remodelage de la matrice extracellulaire et les réponses au stress. Dans les contextes vasculaire, rénal, pulmonaire et cardiaque, une activité de Nox4 dérégulée a été associée à un remodelage dépendant du stress oxydant, à l’inflammation et à des processus fibrosants. En tant que régulateur rédox, Nox4 est fréquemment étudiée pour ses effets sur la fonction endothéliale, l’activation des fibroblastes et l’adaptation métabolique en situation d’hypoxie ou sous des stimuli inflammatoires.
Nox4 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nox4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nox4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nox4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nox4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.