NOS2/iNOS Lentiviral Activation Particles (h): sc-400066-LAC

Das humane Gen **NOS2** kodiert die induzierbare Stickstoffmonoxid-Synthase (**iNOS**), ein Enzym mit hoher Umsatzleistung, das als Reaktion auf entzündliche Signale **L-Arginin** zu **Stickstoffmonoxid (NO)** und **L-Citrullin** umsetzt. NOS2/iNOS wird transkriptionell nachgeschaltet zu **NF-κB**-, **JAK/STAT**- und **MAPK**-Signalwegen reguliert und integriert zytokin- sowie mikrobiell mustergetriebene Pfade, um die angeborene Immunität, das Redoxgleichgewicht und antimikrobielle Effektorfunktionen zu steuern. Anhaltende iNOS-Aktivität beeinflusst nitrosativen Stress, die **S‑Nitrosylierung** von Proteinen und die mitochondriale Funktion, mit nachgelagerten Effekten auf Apoptose, angiogene Signalgebung und den Umbau der extrazellulären Matrix. Eine fehlregulierte NOS2-Expression wurde mit chronischen Entzündungen und der Biologie des Tumormikromilieus in Verbindung gebracht, weshalb NOS2 häufig als Ziel in mechanistischen Studien der Immunologie, Neuroinflammation und krebsassoziierten Signaltransduktion genutzt wird.

NOS2/iNOS Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NOS2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

NOS2/iNOS Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NOS2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen NOS2/iNOS-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NOS2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.