Norpeg Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408852

Descripción general

RAI14 codifica Norpeg, una proteína asociada al citoesqueleto implicada en la organización de estructuras ricas en actina y en la regulación de la morfología, la adhesión y la motilidad celular. Norpeg se ha relacionado con procesos de señalización que coordinan la remodelación del citoesqueleto, lo que respalda su papel en la migración celular y en la dinámica epitelial/mesenquimal. Estudios de expresión y funcionales han asociado RAI14 con contextos de alteración del control del crecimiento celular y de la arquitectura tisular, lo que la hace relevante para investigaciones de fenotipos proliferativos e invasivos. Como factor tipo andamiaje, Norpeg ofrece un punto de partida útil para desentrañar cómo la organización del citoesqueleto se entrecruza con la señalización intracelular y con programas sensibles al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Norpeg (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RAI14 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RAI14 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RAI14 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Norpeg.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RAI14 para la investigación de la señalización de Norpeg, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RAI14 críticos para la función de Norpeg
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RAI14 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Norpeg CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Norpeg CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RAI14. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Norpeg (h) y el plásmido HDR Norpeg (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RAI14 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RAI14 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.