NOR-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401813
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NOR-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NOR-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NOR-1 Anticuerpo (H-7): sc-393902
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NOR-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401813 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
NR4A3 codifica el receptor nuclear huérfano NOR-1 (NR4A3), un factor de transcripción de respuesta inmediata, independiente de ligando, que acopla rápidamente señales extracelulares a programas de expresión génica. NOR-1 regula la diferenciación celular, la proliferación, la apoptosis y la adaptación metabólica al modular redes transcripcionales aguas abajo de la señalización MAPK/ERK y de otras vías sensibles al estrés, y puede influir en la expresión de genes asociados con la inflamación y la respuesta inmunitaria. La actividad desregulada de NR4A3 se ha relacionado con fenotipos oncogénicos y metabólicos, y los reordenamientos de NR4A3 están implicados en ciertos sarcomas, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos del control transcripcional en contextos relacionados con enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NOR-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NR4A3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NR4A3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NR4A3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NOR-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NR4A3 para la investigación de la señalización de NOR-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de NR4A3 críticos para la función de NOR-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NR4A3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NOR-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NOR-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NR4A3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NOR-1 (h) y el plásmido HDR NOR-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NR4A3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NR4A3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.