NOK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433993
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NOK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NOK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NOK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433993 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A quinase de serina/treonina/tirosina 1 (Styk1), também conhecida como NOK, codifica uma quinase proteica do tipo receptor implicada na regulação da sinalização responsiva a fatores de crescimento e do comportamento de células epiteliais. Em sistemas murinos, a NOK tem sido associada à modulação dos outputs das vias MAPK/ERK e PI3K/AKT, que influenciam a proliferação, a sobrevivência e fenótipos de transformação celular. Alterações na atividade de STYK1/NOK têm sido relacionadas a contextos de sinalização oncogénica, tornando-a relevante para estudos mecanísticos da biologia tumoral e da reconfiguração de redes impulsionada por quinases. Essas características posicionam a Styk1 como um nó útil para dissecar o crosstalk entre quinases receptoras, eventos de fosforilação a jusante e programas de sinalização adaptativos ao stress.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NOK (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Styk1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Styk1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Styk1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NOK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Styk1 para a investigação da sinalização de NOK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Styk1 críticos para a função NOK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Styk1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NOK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NOK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Styk1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NOK Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NOK (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Styk1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Styk1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.