Nodal CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401439

개요

NODAL은 초기 발생 과정에서 중배엽·내배엽(메센도더름) 운명 결정, 좌우 축 형성, 그리고 다능성 프로그램의 유지에 관여하는 분비형 TGF-β 슈퍼패밀리 형태형성인자(morphogen)인 Nodal을 암호화합니다. Nodal은 주로 Activin 수용체와 SMAD2/3를 통해 신호를 전달합니다. 인간 세포에서 Nodal은 LEFTY와 같은 피드백 조절因자들과 통합되어 작동하며, WNT 및 FGF 경로와의 상호작용(crosstalk)을 통해 계통(lineage) 선택, 상피–중간엽 전이(EMT), 그리고 줄기세포 상태를 조절하는 전사 네트워크를 형성합니다. 비정상적인 NODAL 발현은 여러 종양 맥락에서 보고되어 왔고, 침윤성 표현형, 세포 가소성, 그리고 내성과 연관된 신호 회로와의 관련성 때문에 자주 연구됩니다. 경로의 핵심 노드로서 Nodal은 발생생물학, 암생물학, 그리고 줄기세포 분화 모델에서 흔히 분석 대상이 됩니다.

Nodal CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NODAL 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NODAL 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NODAL의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Nodal 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Nodal 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NODAL 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Nodal 기능에 중요한 NODAL 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NODAL 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Nodal CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Nodal CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NODAL 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Nodal HDR 플라스미드 (h) 및 Nodal HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NODAL 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NODAL 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.