NKD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406642

Descripción general

NKD1 (homólogo 1 de cutícula desnuda) codifica un regulador citoplasmático de retroalimentación de la señalización Wnt/β-catenina que se une a proteínas Dishevelled para atenuar la activación de la vía. Al modular programas de transcripción dependientes de β-catenina, NKD1 influye en decisiones de destino celular, la diferenciación epitelial y la homeostasis tisular. La expresión o función alteradas de NKD1 se han asociado con una señalización Wnt desregulada en contextos relacionados con el cáncer, incluidos efectos sobre la proliferación, la migración y firmas transcripcionales impulsadas por la vía. Como modulador de la vía Wnt, NKD1 se estudia con frecuencia en modelos de señalización oncogénica, biología del desarrollo y regulación de células epiteliales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NKD1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NKD1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NKD1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NKD1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NKD1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NKD1 para la investigación de la señalización de NKD1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NKD1 críticos para la función de NKD1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NKD1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NKD1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NKD1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NKD1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NKD1 (h) y el plásmido HDR NKD1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NKD1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NKD1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.