Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO neuroserpin (h): sc-406912
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- neuroserpin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique neuroserpin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: neuroserpin Antibody (C-9): sc-48360
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO neuroserpin (h) | sc-406912 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SERPINI1 code la neuroserpine, un inhibiteur sécrété des protéases à sérine (serpine) qui régule la protéolyse extracellulaire, notamment en inhibant l’activateur tissulaire du plasminogène (tPA). En modulant la cascade d’activation du plasminogène, la neuroserpine influence le remodelage de la matrice péricellulaire, la plasticité synaptique et la signalisation dépendante des protéases dans le système nerveux. SERPINI1 est fortement exprimé dans les neurones et est lié à la stabilité conformationnelle des protéines ainsi qu’aux voies de contrôle qualité du réticulum endoplasmique (RE), en raison de sa propension au mauvais repliement sous l’effet de variants pathogènes. Une dérégulation de la neuroserpine a été associée à des phénotypes neurodégénératifs et à une vulnérabilité neuronale lorsque l’équilibre des protéases et la protéostasie sont déterminants.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO neuroserpin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SERPINI1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SERPINI1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SERPINI1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine neuroserpin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SERPINI1 pour l'étude de la signalisation de neuroserpin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SERPINI1 essentiels à la fonction de neuroserpin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SERPINI1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le neuroserpin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le neuroserpin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SERPINI1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le neuroserpin plasmide HDR (h) et le neuroserpin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SERPINI1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SERPINI1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.