Plásmido Doble Nickase (h) Neu2: sc-408479-NIC

El gen humano **NEU2** codifica la neuraminidasa citosólica 2 (Neu2), una sialidasa que elimina los ácidos siálicos terminales de glicoproteínas y glicolípidos, modulando así la composición y el recambio de los glicoconjugados celulares. Al regular el estado de sialilación, **NEU2** influye en la señalización dependiente de glicanos, la dinámica de membrana y los procesos del metabolismo de carbohidratos que se entrecruzan con vías que controlan la diferenciación y las respuestas al estrés. La actividad de sialidasa alterada y los patrones aberrantes de sialilación se han asociado con interacciones célula–célula desreguladas y fenotipos oncogénicos, lo que convierte a **NEU2** en un objetivo útil para estudiar cómo la remodelación de la glicosilación afecta a la biología relevante para la enfermedad. El análisis funcional de **NEU2** respalda la investigación mecanística de las redes de procesamiento de glicanos y de sus funciones en la homeostasis celular.

Neu2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NEU2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NEU2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NEU2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NEU2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.