Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NEIL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403778
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NEIL1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NEIL1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NEIL1 Anticuerpo (D-1): sc-271164
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NEIL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403778 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
NEIL1 (endonucleasa VIII-like 1) es una ADN glicosilasa/liasa AP que inicia la reparación por escisión de bases al reconocer y escindir lesiones oxidativas del ADN, incluidas pirimidinas dañadas, y al procesar sitios abásicos para promover la incisión de la hebra. Actúa dentro de las vías de respuesta al estrés oxidativo y de mantenimiento del genoma, coordinándose con enzimas posteriores de la BER para restaurar la integridad del ADN durante la replicación y la transcripción. La actividad de NEIL1 influye en la acumulación de mutaciones y la estabilidad cromosómica, lo que vincula su desregulación con mecanismos subyacentes a la carcinogénesis y a otros trastornos asociados al daño oxidativo del ADN. Como factor de reparación nuclear, NEIL1 se estudia con frecuencia en el contexto de la reparación asociada a la replicación, la estabilidad del genoma mitocondrial/nuclear y las respuestas celulares a las especies reactivas de oxígeno.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NEIL1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NEIL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NEIL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NEIL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NEIL1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NEIL1 para la investigación de la señalización de NEIL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de NEIL1 críticos para la función de NEIL1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NEIL1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NEIL1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NEIL1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NEIL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NEIL1 (h) y el plásmido HDR NEIL1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NEIL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NEIL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.