CRISPR 데이터가 아님: 이 이미지는 CRISPR 실험 결과를 시각화하기 위한 항체 품질을 보여줍니다.
CRISPR 데이터가 아님: 이 이미지는 CRISPR 실험 결과를 시각화하기 위한 항체 품질을 보여줍니다.
NEDD4-L CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-429949
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- NEDD4-L CRISPR/Cas9 녹아웃(KO) 플라스미드 (m)은 플라스미드 풀로, 각 플라스미드는 Cas9 뉴클레아제와 표적 특이적 20nt 가이드 RNA(gRNA)를 암호화하며, GeCKO v2 라이브러리에서 유래한 서열을 사용하여 녹아웃 효율을 극대화하도록 설계되었습니다.
- gRNA 서열은 Cas9가 NEDD4-L 게놈 위치에서 부위 특이적 이중 가닥 절단(DSBs)을 유도하도록 유도하며, 이는 비동종 말단 결합(NHEJ)을 통해 유전자 녹아웃을 초래합니다
- 푸로마이신 내성 및 RFP 유전자는 LoxP 사이트로 둘러싸여 있어, 안정적인 녹아웃 세포주를 확립한 후 Cre 재조합효소(Cre 벡터: sc-418923)를 통해 선택 마커를 제거할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 NEDD4-L Antibody (C-8): sc-514954
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
NEDD4-L CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m) | sc-429949 | 20 µg | $397.00 |
개요
Nedd4l은 HECT 도메인을 가진 E3 유비퀴틴 리가아제인 NEDD4-L을 암호화하며, ENaC와 같은 이온 채널 및 수송체를 포함한 막 단백질과 신호전달 단백질의 유비퀴틴화를 촉매하여 단백질 턴오버를 조절합니다. 유비퀴틴 의존적 엔도사이토시스와 리소좀/프로테아좀 분해의 조절을 통해 NEDD4-L은 상피의 이온 항상성과 세포 스트레스 반응 및 조직 리모델링에 관여하는 신호전달 경로에 영향을 미칩니다. 마우스 시스템에서는 Nedd4l 활성 변화가 나트륨 처리 및 혈압 조절의 이상과 연관된 것으로 보고되었고, 신장 생리, 심혈관계 표현형, 염증성 신호전달 등의 맥락에서 연구되어 왔습니다. 또한 NEDD4-L은 세포 극성과 분화를 조절하는 경로와도 연결되어 있어, 상피 장벽 기능과 발생 과정 연구에서도 중요한 표적입니다.
NEDD4-L CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Nedd4l 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Nedd4l 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.
다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Nedd4l의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NEDD4-L 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.
이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NEDD4-L 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Nedd4l 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.
주요 특징
- NEDD4-L 기능에 중요한 Nedd4l 엑손을 표적하는 sgRNA
전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Nedd4l 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
형질전환을 통한 전달과 호환
설계 변형
CRISPRs +/- HDR
- NEDD4-L CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 NEDD4-L CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Nedd4l 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
NEDD4-L HDR 플라스미드 (m) 및 NEDD4-L HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Nedd4l 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Nedd4l 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.