NDRG1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402294-LAC

NDRG1 (N-myc downstream regulated gene 1) kodiert ein zytoplasmatisches Protein, das an zellulären Stressantworten, Differenzierung und der Regulation der Proliferation beteiligt ist. NDRG1 wird mit der Kontrolle des Membrantransports und der Organisation des Zytoskeletts in Verbindung gebracht, mit nachgeschalteten Effekten auf die epithelial-mesenchymale Plastizität, Migration sowie adhäsionsbezogene Signalprogramme. Seine Expression reagiert auf Hypoxie- und onkogene Signalkontexte, was es zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung transkriptioneller Anpassungen an mikroumgebungsbedingten Stress macht. Eine Fehlregulation von NDRG1 wurde in mehreren Krankheitsmodellen beschrieben, darunter in der Krebsbiologie und bei peripherer Neuropathie, was mechanistische Studien zur Regulation von Zellzuständen unterstützt.

NDRG1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NDRG1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

NDRG1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NDRG1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen NDRG1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NDRG1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.