NDR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402716

Descripción general

STK38 codifica la quinasa de serina/treonina NDR1, una quinasa de la familia AGC que actúa aguas abajo de MST1/2 en la señalización relacionada con Hippo para regular la progresión del ciclo celular, la biología del centrosoma, la apoptosis y la organización del citoesqueleto. La actividad de NDR1 está controlada por fosforilación y por la unión a cofactores (incluidas las proteínas MOB), lo que conecta señales upstream de estrés y polaridad con resultados transcripcionales y estructurales. Gracias a sus funciones en el control mitótico, las respuestas asociadas al daño del ADN y la homeostasis epitelial, STK38/NDR1 se ha estudiado en contextos relevantes para la biología tumoral, la neurobiología y la señalización relacionada con la inflamación. La alteración de las vías dependientes de NDR1 puede influir en fenotipos de proliferación, supervivencia y migración que se evalúan con frecuencia en modelos mecanísticos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NDR1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen STK38 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del STK38 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de STK38 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NDR1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en STK38 para la investigación de la señalización de NDR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de STK38 críticos para la función de NDR1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de STK38 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NDR1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NDR1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus STK38. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NDR1 (h) y el plásmido HDR NDR1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología STK38 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana STK38 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.