Na+ CP type IIIα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406612
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Na+ CP type IIIα O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Na+ CP type IIIα, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Na+ CP type IIIα Anticorpo (3F3): sc-517010
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Na+ CP type IIIα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406612 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SCN3A codifica o canal de sódio humano dependente de voltagem Na⁺ CP tipo IIIα, uma subunidade α formadora de poro que sustenta o influxo rápido e transitório de Na⁺ necessário para a iniciação e a propagação do potencial de ação em células excitáveis. A abertura/fechamento (gating) do canal e sua localização na membrana integram-se às redes de excitabilidade neuronal, incluindo a regulação dos limiares de despolarização, da frequência de disparo e da sinalização dependente de atividade. A função de SCN3A se relaciona com vias mais amplas de homeostase iônica e de transmissão sináptica, nas quais correntes de sódio alteradas podem perturbar o desenvolvimento de circuitos e a excitabilidade. A desregulação genética e funcional de SCN3A tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a manifestações relacionadas a crises epilépticas, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de canalopatias e disfunção eletrofisiológica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Na+ CP type IIIα (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SCN3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SCN3A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SCN3A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Na+ CP type IIIα.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SCN3A para a investigação da sinalização de Na+ CP type IIIα, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SCN3A críticos para a função Na+ CP type IIIα
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SCN3A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Na+ CP type IIIα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Na+ CP type IIIα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SCN3A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Na+ CP type IIIα Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Na+ CP type IIIα (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SCN3A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SCN3A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.