Nap-22 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r): sc-437379

Übersicht

Nap-22 (auch als BASP1 bekannt) ist ein in Neuronen angereichertes, membranassoziiertes Protein, das über Interaktionen mit Phospholipiden und Signalkomplexen an der Plasmamembran an der Regulation des Axonwachstums, des Neuritenwachstums und der synaptischen Funktion beteiligt ist. Es wirkt an aktivitätsabhängiger neuronaler Plastizität mit und wurde mit der Organisation des Zytoskeletts sowie mit Prozessen des Vesikeltransports in Verbindung gebracht, die die Dynamik des Wachstumskegels prägen. Nap-22 wurde außerdem im Zusammenhang mit der transkriptionellen Regulation über nukleäre Interaktionen untersucht und verknüpft dabei extrazelluläre Signale mit Genexpressionsprogrammen, die für die neuronale Differenzierung relevant sind. Eine veränderte Nap-22-Expression oder -Lokalisierung wurde in Forschungsfeldern zu neuroentwicklungsbedingten und neurodegenerativen Erkrankungen beobachtet, in denen Membransignalgebung und synaptisches Remodeling gestört sind.

Das Nap-22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des -Gens in rat-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des -Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Nap-22-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von -defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Nap-22-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf -Exone abzielen, die für die Nap-22-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere -Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Nap-22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r) und vom Nap-22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des -Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Nap-22 HDR-Plasmid (r) und Nap-22 HDR-Plasmid (r2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von -Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten -Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.