Particules Lentivirales d'Activation (h) NaBC1: sc-405950-LAC

BCAS1 (NaBC1) est une protéine humaine fortement enrichie dans les cellules de la lignée oligodendrocytaire et largement utilisée comme marqueur des oligodendrocytes nouvellement formés et en cours de myélinisation. Son expression suit des programmes de différenciation qui coordonnent le remodelage du cytosquelette, l’expansion membranaire et la formation d’une gaine de myéline riche en lipides, reliant ainsi la biologie de BCAS1 aux interactions axone–glie et à l’homéostasie de la substance blanche. Des profils d’expression altérés de BCAS1 ont été rapportés dans des contextes de démyélinisation et de neuroinflammation, ce qui étaye sa pertinence pour l’étude de la dynamique de remyélinisation et de l’hétérogénéité gliale. Dans les systèmes expérimentaux, la modulation de BCAS1 offre un levier pour analyser les états transcriptionnels associés à la maturation des oligodendrocytes et aux processus cellulaires liés à la myéline.

Les particules d'activation lentivirales NaBC1 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de BCAS1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales NaBC1 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription BCAS1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de NaBC1. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif BCAS1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.