N4BP2 Double Nickase Plasmid (h): sc-412585-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das N4BP2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- N4BP2 Double-Nickase-Plasmid (h) und N4BP2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf N4BP2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
N4BP2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-412585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
N4BP2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-412585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
N4BP2 (NEDD4-binding protein 2) kodiert ein großes intrazelluläres Protein, das über Interaktionen mit E3-Ligasen der NEDD4-Familie an ubiquitinassoziierten Signalwegen beteiligt ist. Dies deutet auf eine Rolle bei der Regulation von Proteinumsatz und -transport hin. Zunehmende Evidenz verknüpft N4BP2 mit Signalwegen, die Immun- und Entzündungsreaktionen prägen, darunter die Modulation von NF-κB-bezogenen Signalprozessen und zellulären Aktivierungszuständen. Eine veränderte Expression oder genetische Störung von N4BP2 wurde im Kontext hämatologischer sowie solider Tumorbiologie untersucht, wo die ubiquitinabhängige Kontrolle von Signalübertragung und Proteostase Proliferation, Stressantworten und Genomstabilität beeinflussen kann. Damit ist N4BP2 ein nützliches Ziel für mechanistische Studien der Ubiquitin-Regulationsnetzwerke und nachgeschalteter transkriptioneller Programme in menschlichen Zellen.
N4BP2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des N4BP2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von N4BP2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die N4BP2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit N4BP2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.